组氨酸标签蛋白纯化方法
女 | 38岁
2018-10-14
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问题描述:我要表达的蛋白序列需要加一个组氨酸标签,方便后面的分离纯化,我该怎么加?分离纯化后对标签进行切割常用的酶切位点又是怎么样的呢?
回答
组氨酸标签是一种融合标签,它可与多种蛋白形成融合蛋白,基于组氨酸的咪唑环与金属离子(如镍离子)起化学作用而生成螯合的原理,可以利用标签纯化融合蛋白,抗体具有高灵敏度,高特异性和高亲和力,随着生物技术的发展,科研人员可以通过DNA重组技术,构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白,进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化,以达到研究的需求